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Immunocytochemistry

analysis


세포 수준의 표적 단백질 검출 및 정량화 서비스





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Immunocytochemistry
analysis

세포 수준의 표적 단백질 검출 및 정량화 서비스

 논문 기반 ICC 분석을 서비스를 제공합니다.

Immunocytochemistry(ICC)는 항체를 이용해 세포 내 특정 단백질의 발현과 위치를 시각화하는 분석 기법입니다. 


당사는 국제 학술지 게재 기준에 맞춘 프로토콜과 정량 분석 방법을 기반으로 실험을 설계하고 수행합니다. 단순 이미지 제공이 아닌, 논문 수준의 데이터 해석 및 통계 분석까지 지원합니다. 연구 목적에 최적화된 ICC 결과를 통해 신뢰도 높은 학술 데이터를 제공합니다.

논문 기반 ICC 분석 플랫폼

  • TGF-β1 (10 ng/mL, 24 h) 유도 A549 EMT 모델 
  • Radotinib 논문과 동일한 ICC 조건(Fixation, Blocking, Antibody 등) 
  • E-cadherin / α-SMA / F-actin / DAPI 핵 염색 
  • Confocal microscopy(예: Zeiss LSM 시리즈) 기반 고해상도 이미지 
  • ImageJ/Fiji 기반 정량 분석(MFI, positive area 등)

※ 필요 시, 귀사 후보물질에 맞춰 세포주(A549 외 primary cell 등)와 자극 조건(TGF-β1 농도·시간)을 커스터마이징할 수 있습니다.

그림 1. TGF-β1 유도로 EMT가 유도된 세포에서 α-SMA 증가, E-cadherin 감소, F-actin 이 재구성된 패턴을 확인한 ICC 예시
그림 1. TGF-β1 유도로 EMT가 유도된 세포에서 α-SMA 증가, E-cadherin 감소, F-actin 이 재구성된 패턴을 확인한 ICC 예시

논문 기반 ICC 실험 조건 (서비스 SOP)

1) 세포 및 처리 조건

  • 세포는 confocal dish에 seeding 
  • 세포내의 독성이 없는 조건 내에서 24h~48h 내에 처리

2) Fixation & Permeabilization

  • 실험 조건에 따라 세포를 4%포름알데하이드로 고정 
  • 실험 조건에 따라 0.1% Triton-X100을 이용하여 permeabilization을 수행

3) Blocking & Antibody

  • 5% BSA 기반 Blocking (1 h, RT)
  • Primary는 RT에서 1h 혹은 냉장 조건에서 16h 이상 반응 
  • Secondary: Alexa Fluor 계열 형광 항체
  • DAPI로 핵 염색 후 Mounting
  • 염색된 샘플은 Confocal 혹은 형광 현미경으로 관찰 하여 데이터를 확보 

4) 정량 분석 (ImageJ 기반)

  • 정량 분석은 Image J 기반으로 분석 
  • Mean Fluorescence Intensity (MFI) 
  • Positive area (%) 또는 positive cell 비율 
  • E-cadherin / α-SMA ratio (EMT index) 
  • F-actin stress fiber score (형태학 스코어링)
  • Field 당 cell 수, group 간 통계분석(t-test/ANOVA)

분석 마커 및 해석 포인트

E-cadherin (상피세포 마커)

  • 상피세포 특이적 cell-cell junction 단백질
  • TGF-β1 처리 → 발현 감소(EMT 진행)
  • 후보물질 처리로 E-cadherin 회복 여부 평가
  • 세포막 localization 유지 여부 인지

α-SMA (섬유화 마커)

  • myofibroblast 활성화의 대표 마커
  • TGF-β1 → α-SMA 발현 증가
  • 후보물질이 α-SMA 발현 상승을 억제하는지 분석
  • 섬유화 억제제/항기질화 물질의 핵심 평가지표

F-actin (세포골격 재구성)

  • EMT에 따라 스트레스 파이버(stress fiber) 증가
  • 세포 형태 변화 및 이동성 증가와 연관
  • 후보물질이 actin 재배열을 정상화하는지 평가

ICC 기반 항섬유화 기전 분석 CRO 패키지

Package 1
Basic EMT-ICC
구성 내용
  • E-cadherin / α-SMA / F-actin 3종 ICC
  • TGF-β1 EMT 모델 + 단일 농도 후보물질
  • 고해상도 이미지 + 기본 정량(MFI, positive area)
적용 예시
  • 후보물질 EMT 억제 가능성 1차 평가
Package 2
Advanced Fibrosis-ICC
구성 내용
  • Basic EMT-ICC 패키지 포함
  • 추가 섬유화/EMT 마커(예: Vimentin, N-cadherin) 옵션
  • Smad2/3 nuclear translocation ICC 연계 가능
적용 예시
  • 섬유화 기전(EMT → myofibroblast) 심화 분석
Package 3
ICC + WB + qPCR 통합
구성 내용
  • ICC: E-cad, α-SMA, F-actin, 선택 마커
  • Western blot: Smad2/3, ERK, p38, AKT 등 signaling
  • qPCR: Snail, Twist, Collagen, TGF-β1 경로 유전자
  • 논문 수준 Figure & 레포트 제공
적용 예시
  • 논문/특허/과제용 항섬유화 기전 완성 패키지
Package 4
Custom EMT/Fibrosis
구성 내용
  • 고객 맞춤 세포주/자극/타깃 마커 설계
  • 2D/3D culture, co-culture 등 커스터마이징
  • in vitro → in vivo 데이터 연계 자문 가능
적용 예시
  • 특수 모델, 독자적 기전 연구 프로젝트

 UMUST R&D만의 차별성

  • Radotinib 항섬유화 논문 기반 ICC 프로토콜 적용 
  • EMT·섬유화·TGF-β1 경로 전문성 보유
  •  ICC + Western blot + qPCR + 조직병리(H&E, IHC)까지 One-stop 
  • ISO 9001 품질 시스템을 기반으로 SOP 관리
  • 논문 작성 경험을 바탕으로 Figure · Legend · 결과 해석까지 지원

제공 산출물 (Deliverables)

  • 고해상 ICC 이미지
  • 마커별 MFI, positive area, cell count 등 정량 데이터(Excel) 
  • 군 간 통계 분석 결과(p-value 포함)
  •  EMT/Fibrosis index 기반 평가 리포트(PDF) 
  • 논문 스타일 Figure(복수 패널 구성 및 라벨링 포함, 요청 시)

논문 기반 ICC 분석을 제공합니다.

Immunocytochemistry(ICC)는 항체를 이용해 세포 내 특정 단백질의 발현과 위치를 시각화하는 분석 기법입니다. 


당사는 국제 학술지 게재 기준에 맞춘 프로토콜과 정량 분석 방법을 기반으로 실험을 설계하고 수행합니다. 단순 이미지 제공이 아닌, 논문 수준의 데이터 해석 및 통계 분석까지 지원합니다. 연구 목적에 최적화된 ICC 결과를 통해 신뢰도 높은 학술 데이터를 제공합니다.

논문 기반 ICC 분석 플랫폼

  • TGF-β1 (10 ng/mL, 24 h) 유도 A549 EMT 모델
  • Radotinib 논문과 동일한 ICC 조건(Fixation, Blocking, Antibody 등)
  • E-cadherin / α-SMA / F-actin / DAPI 핵 염색
  • Confocal microscopy(예: Zeiss LSM 시리즈) 기반 고해상도 이미지
  • ImageJ/Fiji 기반 정량 분석(MFI, positive area 등)

※ 필요 시, 귀사 후보물질에 맞춰 세포주(A549 외 primary cell 등)와 자극 조건(TGF-β1 농도·시간)을 커스터마이징할 수 있습니다.

그림 1. TGF-β1 유도로 EMT가 유도된 세포에서 α-SMA 증가, E-cadherin 감소, F-actin 이 재구성된 패턴을 확인한 ICC 예시
Baek S, Kwon SH, Jeon JY, Lee GY, Ju HS, Yun HJ, Cho DJ, Lee KP, Nam MH. Radotinib attenuates TGFβ -mediated pulmonary fibrosis in vitro and in vivo: exploring the potential of drug repurposing. BMC Pharmacol Toxicol. 2022 Dec 15;23(1):93. doi: 10.1186/s40360-022-00634-x. PMID: 36522756; PMCID: PMC9753032.
그림 1. TGF-β1 유도로 EMT가 유도된 세포에서 α-SMA 증가, E-cadherin 감소, F-actin 이 재구성된 패턴을 확인한 ICC 예시
Baek S, Kwon SH, Jeon JY, Lee GY, Ju HS, Yun HJ, Cho DJ, Lee KP, Nam MH. Radotinib attenuates TGFβ -mediated pulmonary fibrosis in vitro and in vivo: exploring the potential of drug repurposing. BMC Pharmacol Toxicol. 2022 Dec 15;23(1):93. doi: 10.1186/s40360-022-00634-x. PMID: 36522756; PMCID: PMC9753032.

논문 기반 ICC 실험 조건 (서비스 SOP)

1) 세포 및 처리 조건
  • 세포는 confocal dish에 seeding 하여 사용 
  • 세포내의 독성이 없는 조건 내에서 24h~48h 내에 처리 
3) Blocking & Antibody & 현미경 촬영 
  • 5% BSA 기반 Blocking (1 h, RT)
  • Primary는 RT에서 1h 혹은 냉장 조건에서 16h 이상 반응 
  • Secondary: Alexa Fluor 계열 형광 항체
  • DAPI로 핵 염색 후 Mounting
  • 염색된 샘플은 Confocal 혹은 형광 현미경으로 관찰 하여 데이터를 확보 


2) Fixation & Permeabilization
  • 실험 조건에 따라 세포를 4%포름알데하이드로 고정 
  • 실험 조건에 따라 0.1% Triton-X100을 이용하여 permeabilization을 수행 
4) 정량 분석 (ImageJ 기반)
  • 정량 분석은 Image J 기반으로 분석 
  • Mean Fluorescence Intensity (MFI) 
  • Positive area (%) 또는 positive cell 비율 
  • E-cadherin / α-SMA ratio (EMT index) 
  • F-actin stress fiber score (형태학 스코어링)
  • Field 당 cell 수, group 간 통계분석(t-test/ANOVA)

분석 마커 및 해석 포인트

E-cadherin (상피세포 마커)
  • 상피세포 특이적 cell-cell junction 단백질
  • TGF-β1 처리 → 발현 감소(EMT 진행)
  • 후보물질 처리로 E-cadherin 회복 여부 평가
  • 세포막 localization 유지 여부 인지
α-SMA (섬유화 마커)
  • myofibroblast 활성화의 대표 마커
  • TGF-β1 → α-SMA 발현 증가
  • 후보물질이 α-SMA 발현 상승을 억제하는지 분석
  • 섬유화 억제제/항기질화 물질의 핵심 평가지표
F-actin (세포골격 재구성)
  • EMT에 따라 스트레스 파이버(stress fiber) 증가
  • 세포 형태 변화 및 이동성 증가와 연관
  • 후보물질이 actin 재배열을 정상화하는지 평가

ICC 기반 항섬유화 기전 분석 CRO 패키지

패키지
구성 내용적용  예
Package 1
Basic EMT-ICC
• E-cadherin / α-SMA / F-actin 3종 ICC
• TGF-β1 EMT 모델 + 단일 농도 후보물질
• 고해상도 이미지 + 기본 정량(MFI, positive area)
후보물질 EMT 억제 가능성 1차 평가
Package 2
Advanced Fibrosis-ICC
• Basic EMT-ICC 패키지 포함
• 추가 섬유화/EMT 마커(예: Vimentin, N-cadherin) 옵션
• Smad2/3 nuclear translocation ICC 연계 가능
섬유화 기전(EMT → myofibroblast) 심화 분석
Package 3
ICC + WB + qPCR 통합  		• ICC: E-cad, α-SMA, F-actin, 선택 마커
• Western blot: Smad2/3, ERK, p38, AKT 등 signaling
• qPCR: Snail, Twist, Collagen, TGF-β1 경로 유전자
• 논문 수준 Figure & 레포트 제공
논문/특허/과제용 항섬유화 기전 완성 패키지
Package 4
Custom EMT/Fibrosis
• 고객 맞춤 세포주/자극/타깃 마커 설계
• 2D/3D culture, co-culture 등 커스터마이징
• in vitro → in vivo 데이터 연계 자문 가능
특수 모델, 독자적 기전 연구 프로젝트


UMUST R&D ICC CRO의 차별성

  • Radotinib 항섬유화 논문 기반 ICC 프로토콜 적용
  • EMT·섬유화·TGF-β1 경로 전문성 보유
  • ICC + Western blot + qPCR + 조직병리(H&E, IHC)까지 One-stop
  • ISO 9001 품질 시스템을 기반으로 SOP 관리
  • 논문 작성 경험을 바탕으로 Figure·Legend·결과 해석까지 지원

제공 산출물 (Deliverables)

  •  ICC 이미지
  • 마커별 MFI, positive area, cell count 등 정량 데이터(Excel)
  • 군 간 통계 분석 결과(p-value 포함)
  • EMT/Fibrosis index 기반 평가 리포트(PDF)
  • 논문 스타일 Figure(복수 패널 구성 및 라벨링 포함, 요청 시)


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귀사의 후보물질이 TGF-β1 유도 EMT 및 섬유화를 억제하는지 ICC로 명확하게 입증하고 싶으신가요?
세포주, 처리 농도, 타깃 마커, 희망하는 데이터 수준(ICC 단독 vs ICC+WB+qPCR)을 알려주시면,
UMUST R&D가 논문 수준 실험 설계와 함께 최적의 CRO 패키지를 제안드립니다.

 


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