RT-PCR
RT-PCR은 세포 내 mRNA를 역전사 효소로 cDNA로 전환한 뒤 특정 유전자를 증폭하여, 아가로스 겔 전기영동으로 발현 여부와 상대적 발현 강도를 확인하는 분자생물학적 분석법입니다. 약물 처리에 따른 타겟 유전자의 발현 변화를 밴드의 유무와 농도 차이로 시각화하여, 약물 작용 기전 규명의 직관적인 증거를 제공합니다. 복수의 유전자를 동시에 분석하는 멀티플렉스 설계가 가능하며, 내부 대조 유전자와의 비교를 통해 발현량을 반정량적으로 평가합니다. 밴드 이미지는 Image J 등 분석 소프트웨어를 통해 밴드 밀도로 정량화하여 군간 비교 데이터를 제공합니다. 염증·암·대사 질환 관련 마커 유전자 발현 확인, 신호 전달 경로 활성화 여부 분석 등 다양한 비임상 연구에 활용됩니다.
약물 처리 후 타겟 유전자의 발현 변화를 분자 수준에서 확인하고 싶으신가요?
연구 목적에 맞는 실험 조합, 단계별 견적, 샘플 조건을 함께 설계해 드립니다.
핵심 원리
주요 구성 요소
분석 절차
RNA Preparation
Total RNA 또는 mRNA를 준비하고, 순도 및 integrity를 확인하여 후속 분석에 적합한 상태를 확보합니다.
Reverse Transcription
목적에 맞는 primer와 RT system을 적용하여 안정적이고 효율적인 cDNA를 합성합니다.
PCR Amplification
cDNA를 기반으로 target gene을 증폭하여 발현 여부 또는 발현량 정밀 평가를 진행합니다.
Data Interpretation
실험 목적에 맞게 유전자 발현 변화를 비교·정리하고, 필요한 경우 정량 분석 데이터까지 제공합니다.
응용 예시
응용 예시
High Quality RNA Handling
RNA purity와 integrity는 RT 효율을 결정하는 핵심 요소입니다. BITOIC는 고품질 RNA 기반 분석 신뢰도를 높입니다.
Optimized RT System
RNA 구조와 분석 목적에 따라 적합한 reverse transcription 조건을 적용하여 안정적인 cDNA 합성을 유도합니다.
Flexible Experimental Design
target gene, sample type, 실험 목적에 따라 primer 선택 및 분석 설계를 유연하게 조정할 수 있습니다.
Integrated Molecular Workflow
RT-PCR 이후 qPCR, 단백질 분석, validation assay 등 후속 연구 단계와 연계하여 활용할 수 있습니다.
FAQ
Q1. 분석하고자 하는 세포 시료를 직접 제공해야 하나요?
세포 시료 또는 이미 추출된 RNA를 제공하시면 됩니다. 세포 시료를 제공하시는 경우 당사에서 RNA 추출부터 전 과정을 진행하며, RNA를 직접 제공하시는 경우 RIN(RNA Integrity Number) 7.0 이상의 품질을 권장합니다. 시료 보관 및 운송은 드라이아이스를 이용한 냉동 상태로 발송해 주시기 바랍니다.
Q2. 프라이머 설계는 어떻게 진행되나요?
분석 타겟 유전자 리스트를 제공해 주시면 당사에서 NCBI Primer-BLAST를 활용하여 타겟 특이적 프라이머를 설계합니다. 의뢰자가 기존에 검증된 프라이머 서열을 보유하고 계신 경우 해당 서열을 그대로 사용할 수 있으며, 이 경우 별도 설계 비용이 발생하지 않습니다.
Q3. 한 번에 몇 개의 유전자까지 분석할 수 있나요?
1회 실험 기준 내부 대조 유전자(β-actin, GAPDH 등) 포함 최대 10~15개의 유전자를 동시에 분석하는 멀티플렉스 설계가 가능합니다. 분석 유전자 수가 많아질수록 프라이머 간 비특이적 반응 가능성이 높아지므로, 20개 이상의 유전자 분석이 필요한 경우 사전 상담을 통해 실험 설계를 최적화하여 진행합니다.
Q4. 밴드가 희미하게 나오거나 비특이적 밴드가 생긴 경우 재실험이 가능한가요?
비특이적 밴드 발생 또는 결과 불명확의 경우, 어닐링 온도·사이클 수·프라이머 농도 조건을 최적화하여 재실험을 진행합니다. 당사 귀책 사유로 인한 결과 이상의 경우 추가 비용 없이 재실험을 원칙으로 하며, 시료 품질 문제로 인한 경우 사전 협의 후 진행합니다.
