Immunocytochemistry(ICC) 분석

실험 개요

Immunocytochemistry(ICC)는 세포 내 목표 단백질을 고감도 형광 기반으로 정확히 검출·시각화하는 기술입니다. 세포를 고정·투과화한 뒤, 표적 단백질에 특이적으로 결합하는 1차 항체와 형광 라벨이 부착된 2차 항체를 순차 처리하여, 형광현미경으로 단백질의 세포 내 위치와 발현량을 정량·정성 분석합니다. 최소 시료량으로도 높은 재현성과 정밀도를 보장하며, 암 연구·신약 후보 물질 평가·바이오마커 스크리닝 등 다양한 산업 응용 분야에 최적화되어 있습니다. 

실험 방법

1. 세포 고정(Fixation): 세포 구조 및 항원을 파라포름알데하이드(PFA)로 고정
2. 투과화(Permeabilization): Triton X-100 등으로 세포막 투과성을 증가
3. 차단(Blocking): 비특이적 항체 결합을 차단하기 위한 BSA 또는 혈청 처리
4. 1차 항체 처리: 항원에 특이적으로 결합하는 항체 처리 (4℃ overnight)
5. 2차 항체 처리: 형광 또는 효소 표지된 항체 처리 (실온에서 수 시간)
6. 세척 및 핵 염색: 세포 핵 염색(DAPI 등) 및 잔여 항체 세척
7. 이미지 관찰 및 분석: 형광현미경 또는 광학현미경을 이용한 관찰 

적용 분야

• 신경과학 연구(뉴런 구조 및 신경전달물질 분석)
• 암 연구(종양 세포 특이 마커 분석)
• 약리학 연구(약물 처리에 따른 세포 반응 평가)
• 줄기세포 및 발달생물학(세포 분화 및 발생 과정 모니터링) 
  

실험 소요 기간

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출처 : Lee KPA, Baek S, Yoon MS, Park JS, Hong BS, Lee SJ, Oh SJ, Kwon SH, Lee R, Lee DH, Park KS, Moon BS. Potential anticancer effect of aspirin and 2′-hydroxy-2,3,5′-trimethoxychalcone-linked polymeric micelles against cervical cancer. Oncology Letters. 2022;23(1):31. doi:10.3892/ol.2021.13149 

출처 : Lee DH, Jung YJ, Koh D, Lim Y, Lee YH, Shin SY. A synthetic chalcone, 2′-hydroxy-2,3,5′-trimethoxychalcone triggers unfolded protein response-mediated apoptosis in breast cancer cells. Cancer Letters. 2016;372(1):1–9. doi:10.1016/j.canlet.2015.12.017